熒光圖像的記錄方法
【明美光電】一般染色之標本,應(yīng)立即觀察,因當時熒光最顯著;若不能馬上觀察,須儲存于干燥盒(Polyethylene Bag) 內(nèi),有時在0~5℃ 儲存,可保存一個月左右,仍可呈現(xiàn)特異熒光。
在熒光顯微鏡之紫外線照射下,染出之特異性熒光會很快消失,故要照相存證者,須于材料新鮮時染色,并馬上照相,才會有好效果。若使用自動相機拍照,則底片以Kodacolo r(ASA 100) film 為宜,儀器則設(shè)定為ASA 400,照完后送洗時應(yīng)指定以ASA 400 沖洗。以此相片再使用適當之正片底片(Kodak#5072) 照相,此時應(yīng)改變不同曝光時間的長短而選最好的片子。
熒光顯微鏡所看到的熒光圖像,一是具有形態(tài)學(xué)特征,二是具有熒光的顏色和亮度,在判斷結(jié)果時,必須將二者結(jié)合起來綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標,即憑工作者目力觀察。
作為一般定性觀察,基本上可靠的。隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展,在不同程度上采用客觀指標記錄判斷結(jié)果,如用細胞分光光度計,圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果,也必須結(jié)合主觀的判斷。
熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易褪色減弱,要即時攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24以上。因紫外光對熒光猝滅作用大,如FITC的標記物,在紫外光下照射30s,熒光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能將熒光圖像拍攝下來。
一般研究型熒光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統(tǒng)裝置CCD顯微鏡攝像頭或CMOS顯微鏡攝像頭。
添加日期:2013-03-18
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